Маҷмӯаи нави кашфи кислотаи нуклеинӣ Coronavirus (SARS-Cov-2).
New Cороnavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluмаъданscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】Маҷмӯаи нави кашфи кислотаи нуклеинии коронавирус (SARS-Cov-2) (Усули санҷиши флуоресцентии RT-PCR)
【Packaging specifications 】25 Санҷиш/Маҷмӯа
【Intended usсинну сол】
Ин маҷмӯа барои муайян кардани сифатии кислотаи нуклеинӣ аз коронавируси нав дар тампонҳои бинӣ, орофарингеалӣ (гулӯ), тампонҳои пеши бинӣ, тампонҳои миёнаи турбинат, шустани бинӣ ва аспиратҳои бинӣ аз ашхосе, ки аз ҷониби провайдери тиббии онҳо ба COVID19 гумонбар мешаванд, истифода мешавад. Муайян кардани генҳои ORF1ab ва N-и коронавируси нав метавонад барои ташхиси ёрирасон ва мониторинги эпидемиологии сирояти нави коронавирус истифода шавад.
【Principles of the pросdure 】
Ин маҷмӯа барои зондҳои мушаххаси TaqMan ва праймерҳои мушаххасе тарҳрезӣ шудааст, ки барои пайдарпаии генҳои нави коронавирус (SARS-Cov-2) ORF1ab ва N тарҳрезӣ шудаанд. Маҳлули реаксияи PCR дорои 3 маҷмӯи праймерҳои мушаххас ва зондҳои флуоресцентӣ барои муайян кардани мушаххаси ҳадафҳо мебошад ва маҷмӯи иловагии праймерҳои мушаххас ва зондҳои флуоресцентӣ ҳамчун назорати стандартии дохилии маҷмӯа барои ошкор кардани генҳои эндогении хонагӣ истифода мешавад.
Принсипи санҷиш аз он иборат аст, ки зондҳои мушаххаси флуоресцентӣ тавассути фаъолияти экзонуклеазии ферментҳои Taq дар реаксияи PCR ҳазм ва таназзул карда мешаванд, то гурӯҳи флуоресценти гузоришдиҳанда ва гурӯҳи хомӯшшудаи флуоресцентӣ ҷудо карда шаванд, то системаи мониторинги флуоресцент метавонад як флуоресцентро қабул кунад. сигнал, ва он гоҳ Тавассути таъсири ғанисозии тақвияти PCR, сигнали флуорессенси зонд ба арзиши ҳадди муқарраршуда - арзиши Ct (ҳадди давра) мерасад. Дар сурати набудани ампликони мақсаднок, гурӯҳи хабарнигори зонд ба гурӯҳи хомӯшкунанда наздик аст. Дар ин вақт интиқоли энергияи резонанси флуоресцентӣ ба амал меояд ва флуорессенсияи гурӯҳи хабарнигорон аз ҷониби гурӯҳи хомӯшкунӣ хомӯш карда мешавад, то сигнали флуоресцентиро асбоби флюоресцентии PCR муайян карда наметавонад.
Барои назорати истифодаи реактивҳо ҳангоми санҷиш, маҷмӯа бо назорати мусбат ва манфӣ муҷаҳҳаз карда шудааст: назорати мусбӣ дорои плазмиди рекомбинатии макони мақсаднок ва назорати манфӣ оби тозашуда мебошад, ки барои назорати ифлосшавии муҳити зист истифода мешавад. Ҳангоми санҷиш тавсия дода мешавад, ки ҳамзамон назорати мусбат ва назорати манфӣ муқаррар карда шавад.
【Main comпоненts 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Компонents | |
| Намe | Specкунондан | Миқдорity | Миқдорity | |
| Назорати мусбӣ | 180 мкл / шиша | 1 | 1 | Плазмидхои ба таври сунъй сохташуда, Оби тозашуда |
| Назорати манфӣ | 180 мкл / шиша | 1 | 1 | Оби тозашуда |
| SARS-Cov-2 омехта | 358,5 мкл/флакон | 1 | / | Ҷуфтҳои мушаххаси праймер, зондҳои мушаххаси флуоресцентӣ, dNTPs, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, оби тозашуда ва ғайра |
| Омехтаи фермент | 16,5 мкл/флакон | 1 | / | Ферментҳои Taq, транскриптазаи баръакс, ферментҳои UNG ва ғайра. |
| SARS-Cov-2 омехта (лиофилизатсияшуда) | 25 озмоиш / шиша | / | 1 | Ҷуфтҳои мушаххаси праймер, зондҳои мушаххаси флуоресцентӣ, dNTPs, ферментҳои Taq, транскриптазаи баръакс, оби тозашуда ва ғайра. |
| 2х буфер | 375 мкл / шиша | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, оби тозашуда ва ғайра. |
Шарҳ:(1) Компонентҳоро дар маҷмӯаҳои гуногуни партия омехта кардан ё иваз кардан мумкин нест.
(2) Реагенти худро омода кунед: Маҷмӯаи истихроҷи кислотаи нуклеинӣ.
【Storage conditions ва expiration date 】
For BST-SARS-25:Дар -20±5℃ барои муддати дароз интиқол ва нигоҳ доред.
For BST-SARS-DR-25:Интиқол дар ҳарорати хонагӣ. Дар -20±5℃ барои муддати дароз нигоҳ доред.
Аз давраҳои такрории яхбандӣ худдорӣ намоед. Мӯҳлати эътибор шартан 12 моҳ муқаррар шудааст.
Ба тамғакоғаз барои санаи истеҳсол ва истифода нигаред.
Пас аз кушодани аввал, реагентро дар -20±5 °C на бештар аз 1 моҳ ё то ба охир расидани давраи реагент нигоҳ доштан мумкин аст, новобаста аз он ки кадом сана аввал меояд, то давраҳои такрории яхкунӣ ва обшавии реагент пешгирӣ карда шавад. -сиклҳои обшавӣ набояд аз 6 маротиба зиёд бошад.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1.Намуди намунаи татбиқшаванда: Маҳлули истихроҷи кислотаи нуклеинӣ.
2.Нигоҳдорӣ ва интиқоли намуна: Дар -20±5℃ барои 6 моҳ нигоҳ доред. Намунаҳоро на бештар аз 6 маротиба ях кунед ва об кунед.
【TЗСШ - Замони Стандарти Шарқӣing metход】
1.Nucleic acid extraction
Барои истихроҷи кислотаи нуклеини вирусӣ маҷмӯаи мувофиқи истихроҷи кислотаи нуклеинро интихоб кунед ва дастурҳои мувофиқи маҷмӯаро иҷро кунед. Тавсия дода мешавад, ки маҷмӯаи истихроҷ ва тозакунии кислотаи нуклеинӣ, ки аз ҷониби Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd истеҳсол шудааст ё маҷмӯаи муодили тозакунии кислотаи нуклеинӣ.
2. Reaction реажnt prepараtion
2.1 For BST-SARS-25:
(1) Омехтаи SARS-Cov-2 ва Enzyme Mix-ро хориҷ кунед, омехтаро дар ҳарорати хонагӣ бо дастгоҳи Vortex бодиққат об кунед ва сипас ба муддати кӯтоҳ центрифуга кунед.
(2) 16,5 uL Enzyme Mix ба 358,5uL SARS-Cov-2 Mix илова карда шуд ва бодиққат омехта карда шуд, то маҳлули реаксияи омехта ба даст ояд.
(3) Як найчаи поки 0,2 мл 8 ПЗР тайёр кунед ва онро бо 15 uL маҳлули омехтаи реаксияи дар боло овардашуда дар як чоҳ қайд кунед.
(4) 15 мкл маҳлули тозашудаи кислотаи нуклеинӣ, назорати мусбат ва назорати манфӣ илова кунед ва сарпӯши найчаи ҳаштсоларо бодиққат пӯшонед.
(5) Тавассути чаппагардон хуб омехта кунед ва зуд центрифуга кунед, то моеъро дар қаъри қубур мутамарказ кунед.
1
2.2 For BST-САРS-DR-25:
(1) 375ul 2x буферро ба омехтаи SARS-Cov-2 ((Лиофилизатсияшуда) барои омода кардани омехтаи реаксия илова кунед. Бо пиптинг бодиққат омехта кунед ва сипас ба муддати кӯтоҳ центрифуга кунед. （Пас аз омода кардани омехтаи реаксия, тавсия дода мешавад, ки дар -20 ℃ дар ҳарорати нигоҳ дошта шавад. нигоҳдории дарозмуддат.)
(2) Як найчаи поки 0,2 мл ПЗР 8 октал тайёр кунед ва онро бо 15 мкл омехтаи реаксия дар як чоҳ қайд кунед.
(3) 15 мкл маҳлули тозашудаи кислотаи нуклеинӣ, назорати мусбат ва назорати манфӣ илова кунед ва сарпӯши найчаи ҳаштсоларо бодиққат пӯшонед.
(4) Тавассути чаппагардон хуб омехта кунед ва зуд центрифуга кунед, то моеъро дар қаъри қубур мутамарказ кунед.
3. PCR ampлифиcation （Лутфан ба дастури асбоб барои танзимоти амалиёт муроҷиат кунед.)
3. 1 найчаи PCR 8-ро ба камераи намунаи асбоби флуоресцентии ПЗР ҷойгир кунед ва намунаи санҷидашаванда, назорати мусбат ва назорати манфиро мувофиқи тартиби боркунӣ муқаррар кунед.
3.2 Канали муайянкунии флуоресцент:
(1) Ген ORF1ab канали муайянкунии FAM-ро интихоб мекунад (Гузориш: FAM, Quencher: Ҳеҷ).
(2) Ген N канали муайянкунии VIC-ро интихоб мекунад (Гузориш: VIC, Quencher: Ҳеҷ).
(3) Ген стандарти дохилӣ канали муайянкунии CY5-ро интихоб мекунад (Гузориш: CY5, Quencher: Ҳеҷ).
(4) Истиноди ғайрифаъол ба ROX гузошта шудааст.
3.3 Танзими параметрҳои барномаи PCR:
| Қадам | Ҳарорат (℃) | Вақт | Шумораи давраҳо | |
| 1 | Реаксияи транскрипсияи баръакс | 50 | 15 дақиқа | 1 |
| 2 | Фаъолсозии ферментҳои Taq | 95 | 2,5 дақ | 1 |
| 3 | Фаъолсозии ферментҳои Taq | 93 | 10 с | 43 |
| Тавассути табобат ва гирифтани флуоресцент | 55 | 30 с | ||
Пас аз танзим, файлро захира кунед ва барномаи реаксияро иҷро кунед.
4.Results analysis
Пас аз ба итмом расидани барнома, натиҷаҳо ба таври худкор захира карда мешаванд ва хати каҷи тақвият таҳлил карда мешавад. Хатти пурқувват ба ҳадди муқаррарии асбоб муқаррар карда мешавад.
【Explanation of test resuлтс 】
1. Муайян кардани дурустии таҷриба: Назорати мусбати FAM, канали VIC бояд каҷравии маъмулӣ дошта бошад ва арзиши Ct одатан аз 34 камтар аст, аммо аз сабаби танзимоти ҳадди ақали асбобҳои гуногун метавонад тағйир ёбад. Назорати манфии FAM, канали VIC бояд Ct пурқувватнашуда бошад. Мувофиқи он аст, ки талаботи дар боло зикршуда бояд дар як вақт риоя карда шаванд, вагарна ин санҷиш эътибор надорад.
2. Ҳукми натиҷа
| Канали FAM/VIC | Натиҷаи ҳукм |
| Ct＜37 | Санҷиши намуна мусбат аст |
| 37≤Ct＜40 | Хатти пурқувватшавӣ S-шакл дорад ва намунаҳои шубҳанок бояд аз нав тафтиш карда шаванд; агар натиҷаи имтиҳони такрорӣ мувофиқ бошад, он мусбат арзёбӣ мешавад, дар акси ҳол манфӣ аст |
| Ct≥40 Ё бе тақвият | Санҷиши намуна манфӣ аст (ё аз ҳадди поёни муайянкунии маҷмӯа) |
Эзоҳ: (1) Агар ҳам канали FAM ва ҳам канали VIC дар як вақт мусбат бошанд, SARS-Cov-2 мусбат аст.
(2) Агар канали FAM ё канали VIC мусбат бошад ва канали дигар манфӣ бошад, санҷиш бояд такрор карда шавад. Агар он ҳамзамон мусбат бошад, он ҳамчун SARS-Cov-2 мусбат арзёбӣ мешавад, вагарна он ҳамчун SARS-Cov-2 манфӣ арзёбӣ мешавад.
Маҳсулоти алоқаманд
-
Маҷмӯаи ташхиси антителоҳои COVID-19 IgM/IgG
Маҷмӯаи ташхиси антителоҳои COVID-19 IgM/IgG (Усули иммунохроматографияи тиллоии коллоидӣ) Дастури маҳсулот 【НОМАИ МАҲСУЛОТ】Маҷмӯаи муайянкунии антителоҳои COVID-19 IgM/IgG (Усули иммунохроматографияи коллоидӣ) Санҷиши SPECKAG1Ks, он 【 Реферат】 Коронавирусҳои нав ба ҷинси β тааллуқ доранд. COVID-19 як бемории шадиди сироятии роҳи нафас аст. Одамон одатан ҳассос мебошанд. Айни замон беморони мубтало ба коронавируси нав манбаи асосии...
-
Маҷмӯаи истихроҷ ё тозакунии кислотаи нуклеинӣ
Маҷмӯаи истихроҷи кислотаи нуклеинӣ ё тозакунӣ ё дар -20 ℃ нигоҳ дошта мешавад. Намуна бояд бо истифода аз curling 0 ℃ интиқол дода шавад. Муқаддима Маҷмӯаи истихроҷ ё тозакунии кислотаи нуклеинӣ (Усули маҳтобҳои магнитӣ) барои тозакунии автоматии РНК ва ДНК аз моеъҳои бадан (ба монанди тампонҳо, плазма, хуноба) бо истифода аз асбобҳои автоматии истихроҷи кислотаи нуклеинӣ тарҳрезӣ шудааст. Технологияи зарраҳои магнитӣ ДНК/РНК-и баландсифатро таъмин мекунад, ки барои ...
-
Маҷмӯаи таҳлили антигени SARS-CoV-2 (иммунохроматогр...
Маҷмӯаи таҳлили антигени SARS-CoV-2 (Усули иммунохроматография) Дастури маҳсулот 【НОМИ МАҲСУЛОТ】Маҷмӯаи таҳлили антигени SARS-CoV-2 (Усули иммунохроматография) 【МАХСУСҲОИ БАСБОЗӢ】 1 Санҷиш/Маҷмӯа ба генҳои вируси ACTONA ABSTR тааллуқ дорад. COVID-19 як бемории шадиди сироятии роҳи нафас аст. Одамон одатан ҳассос мебошанд. Дар ҳоли ҳозир беморони мубтало ба коронавируси нав дар...
-
Маҷмӯаи таҳлили антигени SARS-CoV-2
Маҷмӯаи таҳлили антигени SARS-CoV-2 (Усули иммунохроматография) Дастури маҳсулот 【НОМИ МАҲСУЛОТ】Маҷмӯаи таҳлили антигени SARS-CoV-2 （Усули иммунохроматография) 【МАХСУСҲОИ БАСТАНДОРӢ】 1 Санҷиш/Маҷмӯа/25TABTSKest, 】 Дар коронавирусҳои нав ба насли β тааллуқ доранд. COVID-19 як бемории шадиди сироятии роҳи нафас аст. Одамон одатан ҳассос мебошанд. Айни замон беморони гирифтори коронавируси нав манбаи асосии сироят мебошанд; одамони сироятёфтаи асимптоматикӣ ...